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技術文章

血漿游離血紅蛋白測定方法

點擊次數：15383   發布時間：2012/8/3 11:05:43

ELISA試劑盒分析：血漿游離血紅蛋白測定方法

實驗原理

　　血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態氧，使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化，由無色*終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較，可測出其含量。
實驗方法
　　材料：
　　1．2g/L鄰甲聯苯胺溶液
　　2．1%H2O2
　　3．10%醋酸溶液
　　4．分光光度計
　　方法：
　　1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。
　　2．按下表進行操作，用分光光度計，波長為530nm，以空白管調零，測定測定管的吸光度。

試劑 （ml）
測定管
空白管
2 g/L鄰甲聯苯胺溶液
0.5
0.5
患者血漿
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混勻后室溫放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0
室溫放置10min

　　3.計算公式
　　血漿游離Hb（mg/L）=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算
　　參考范圍：0-40mg/L
注意事項
　　1.一切容器避免血紅蛋白污染；
　　2.采血要順利，器皿要干燥，檢測血漿要新鮮，及時分離，防止人為溶血；
　　3.鄰聯苯胺溶液具致癌性，檢測時要小心，廢液要妥善處理，以免污染；
　　4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準確

原創作者：上海恒遠生物技術發展有限公司

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