影響固體培養基滅菌效果的因素如下：
(1)培養基原材料預濕是否均勻在采用蒸汽滅菌時，是靠水蒸氣的溫度和穿透能力達到滅菌的。水分熱傳導性能比許多固體培養基（木屑、糞草等）的熱傳導性能好，如果培養基預濕適 度均勻，在滅菌過程中溫度傳遞較容易達到均勻；如果培養料預濕不透，僅在料面形成一層水膜，而蒸汽又不能穿透到培養料的 干燥處，那么就達不到滅菌的效果。因此在培養基配料過程 中塊狀培養基（木塊、種木、糞塊）應搗碎，水分均勻浸透。
(2)培養基的酸堿度在培養基含有水的情況下，pH對培養基的滅菌效果有較大的影響。由于氫離子對細胞壁水解和對細 胞質中堿基的親合作用，促成生理反應加劇，加快細胞生命的停 止。因此，偏酸性的培養基可以比中性或微堿性的培養基滅菌時間短。
(3)培養基營養成分在培養基成分中，糖、脂肪和蛋白質 的存在對微生物有一定的保護作用。特別是濃度較高的有機營養物質，當其表面受熱變性后能形成一層保護膜影響熱的傳導，從 而提高微生物的耐熱性。但這種耐熱性同濃度（即基質中含水 量）有關，相反，無機鹽、堿、酸等則可以削弱微生物的耐熱性，這同提高微生物細胞壁的導熱性能有關系。 作為培養食用菌的原料，通過滅菌既要達到無菌狀態，又要保持營養成分少破壞。在滅菌過程中要處理好溫度、壓力和時間的關系，可以根據在高溫條件下微生物死亡比有機物破壞來得快的特性，提高滅菌溫度，縮短滅菌時間，達到既無菌又保護營養的目的。
(4)滅菌方式和滅菌鍋（灶）的容量食用菌制種、制袋生產中，培養料（基）滅菌可在高壓滅菌鍋、常壓滅菌鍋（灶）中 進行。常壓灶滅菌時間長，耗能大，但制作容易，技術和材料要求低。髙壓滅菌設備須按有關壓力容器要求選材和憑證制造檢驗，成本高，但滅菌時間短，效率高，比常壓滅菌。根據實踐經驗，固定常壓滅菌灶每次滅菌以1 000〜2 000袋的容量為 宜，滅菌灶體積小，灶內升溫快，培養基內微生物可自繁時間短，培養基內pH降低少，滅菌效果更有把握。高壓滅菌只要鍋爐蒸汽量與鍋倉體積相適應即可，但蒸汽送氣口的擋氣板應當隨著進汽管口直徑的增大而增大，使蒸汽進人鍋內大面積擴散，這 樣可減少菌瓶菌袋棉塞受潮，防止污染。
(5)滅菌鍋（灶）內培養基的堆疊方式鍋內菌瓶或菌袋排 列形式對滅菌效果影響大，因為塑料袋受熱后變軟，若采用堆柴片式堆疊，在加溫時菌袋之間可能緊貼形成一體，使直徑不足 10厘米的菌袋，變成直徑幾十厘米甚至更大的“菌袋”，導致熱 傳導由表到里的路程變遠，結果延長滅菌時間，影響滅菌效果。菌瓶由于外壁是堅硬的玻璃，瓶與瓶之間有間隙，以致蒸汽較易 使各瓶均勻受熱。如果把菌袋改為“井”字形排列，每3〜4層以層板相隔開后再往上架疊，這樣容易使蒸汽正常對流，鍋 (灶）內溫度均勻，穿透培養基較容易，能取得較好的滅菌效果。有的栽培者為了達到突擊生產的目的，不顧鍋（灶）容量，柴片 式過量堆疊菌袋，其結果不僅滅菌時間拉長，而且效果也不理 想。活動式滅菌灶，容積可達3 000〜5 000筒，周圍應使用周轉 筐裝袋，中部用“井”字型排放。
(6)滅菌鍋（灶）內的溫度與壓力高壓滅菌鍋衡量滅菌效果是通過壓力表和溫度計。濕熱蒸汽滅菌的香菇一種培養基， 要求1.08X105帕的壓力，木屑培養基要求1.47X 105帕的壓力， 這時鍋內溫度在121〜126°C并維持時間1.5〜2小時。在實際操作中，經常發現滅菌不過關的原因是冷空氣排除不干凈。排除冷空氣有兩種方法，一種是先關閉氣閥，當壓力上升到4。 9X104 帕，再打開氣閥排除冷空氣。這種方法要注意棉塞用牛皮紙和棉線扎緊，防止排氣減壓時，棉塞沖出試管口或瓶口；二是從加溫開始就打開氣閥，當氣閥出口蒸汽直立沖出、氣溫較高時才關閉閥門，進人滅菌狀態。常壓滅菌時無排氣問題，但要注意常壓滅菌灶結構對氣流溫度的影響，方形灶內一般靠近盛水鍋的4個邊角氣溫，在建灶時，沿著鍋沿把四個角落砌成圓形，以便灶內均衡升溫，達到同步滅菌的目的。常壓滅菌溫度越高，滅菌所需時間越短。
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