5.18重慶市中山醫院劉老師在我司訂購了人細胞間粘附分子1（ICAM-1）elisa試劑盒、人肺表面活性物質相關蛋白A（SP-A）ELISA試劑盒，有的客戶在訂購ELISA試劑盒的時候都會問到關系ELISA試劑盒的一些問題，ELISA試劑盒主要的問題有哪些呢？
在ELISA試劑盒實驗中，加底物后多長時間終止反應測定結果呢?讓我司錢經理為您講解，一般可采取以下這兩種方法：
、任意確定一個時間，如20分鐘或30分鐘終止反應，測定被檢標本和陽性參考標本的O.D值。
第二、制備好一批酶結合物后預試時間，在反應溫度固定時，當陽性參考血清O.D值達到1.0時終止反應，記錄這個時間，如30分鐘，以后用本批酶結合物測定待檢樣品時都采用同一時間終止反應，這個辦法不需要校正，比較方便。
國外在使用自動測定儀時，加底物后隨時測定，每塊試驗板上陽性參考血清的O.D值，當其達到1.0時，立即將全板上被試標本終止反應進行測定，這樣所得結果比較一致。我國也有自動酶標測定儀，但由于固相載體不夠均勻，也很難用板來直接測定。
在ELISA中所加酶結合物之濃度，加后孵育時間以及加底物后孵育時間。這三個因素也是互相有影響的。一般講，酶結合物濃度低，則要求孵育時間長些，而酶結合物濃度高則要求孵育時間短些，可根據實驗的具體情況，變更不同因素，以取得良好的結果。
由于ELISA中變異因素多，對于要診斷某一疾病時，必須進行一系列實驗室預試，摸索，或叫實驗研究，在酶結合物已經確定的情況下，一般要求預測以下5個條件：
1.抗原包被濃度;
2.被檢血清稀釋度，即測劑量反應曲線;
3.抗體作用時間;
4.酶結合物作用時間;
5.底物作用時間。
一旦試驗條件摸清，以后在正式測定時，必須固定條件，不要隨時改變，以使試驗系統保持足夠的穩定性。
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