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LB培養(yǎng)基中抗生素的貯液配置和工作液濃度

閱讀次數(shù):4537   發(fā)布時(shí)間:2014/2/19 8:58:43

LB培養(yǎng)基是分子生物學(xué)中*常用的一種培養(yǎng)基,用于細(xì)菌培養(yǎng)。本公司所生產(chǎn)的LB培養(yǎng)基原料,NaCl為國(guó)產(chǎn)分析純,胰化蛋白胨及酵母粉為進(jìn)口OXOID。經(jīng)充分混勻所得。

①以水為溶劑的抗生素貯存液應(yīng)用0.22 μm濾器過(guò)濾除菌;
②用乙醇溶解的抗生素溶液無(wú)須過(guò)濾除菌;
③所有抗生素貯液都應(yīng)放于不透光的容器中保存。

注意:鎂離子是四環(huán)素的拮抗劑。對(duì)于以四環(huán)素為篩選抗性的細(xì)菌,應(yīng)使用不含鎂離子的培養(yǎng)基,如LB培養(yǎng)基。

下面是常用抗生素的貯液濃度及工作濃度

氨芐青霉素:貯液濃度   50 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作濃度 20 μg/ml (嚴(yán)緊型質(zhì)粒) 60 μg/ml (松弛型質(zhì)粒)
羧芐青霉素:貯液濃度   50 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作濃度 20 μg/ml (嚴(yán)緊型質(zhì)粒) 60 μg/ml (松弛型質(zhì)粒)
氯霉素:貯液濃度   34 mg/ml  溶于乙醇  -20℃保存  工作濃度 25 μg/ml (嚴(yán)緊型質(zhì)粒) 170 μg/ml (松弛型質(zhì)粒)
卡那霉素:貯液濃度   10 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作濃度 10 μg/ml (嚴(yán)緊型質(zhì)粒) 50 μg/ml (松弛型質(zhì)粒)
鏈霉素:貯液濃度   50 mg/ml  溶于水  -20℃保存  工作濃度 10 μg/ml (嚴(yán)緊型質(zhì)粒) 50 μg/ml (松弛型質(zhì)粒)
四環(huán)素: 貯液濃度   5 mg/ml  溶于乙醇  -20℃保存  工作濃度 10 μg/ml (嚴(yán)緊型質(zhì)粒) 50 μg/ml (松弛型質(zhì)粒)

質(zhì)粒類(lèi)型:

DNA construct

Origin of Replication

Copy number

Classification

Plasmids

 

 

 

pUC vectors

pMB1*

500–700

high copy

pBluescript? vectors

ColE1

300–500

high copy

pGEM? vectors

pMB1*

300–400

high copy

pTZ vectors

pMB1*

>1000

high copy

pBR322 and derivatives

pMB1*

15–20

low copy

pACYC and derivatives

p15A

10–12

low copy

pSC101 and derivatives

pSC101

~5

very low copy

Cosmids

 

 

 

SuperCos

pMB1*

10-20

low copy

pWE15

ColE1

10-20

low copy

 

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