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閱讀次數:1201 發布時間:2014/4/22 9:17:21
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(*小直徑0.2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。
支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和細胞之間。橫斷面與細胞微絨毛相似,但微絨毛電子密度比支原體小,且中央無顆粒群或中央束。
支原體代謝需固醇類物質、部分種類需要精氨酸、O 2或葡萄糖,每一種支原體都有自身持點。多數支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6—8.0),對酸耐受性差。對熱比較敏感,對一般抗生素不敏感。
支原體污染細胞后。培養液可不發生混濁。多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著,細微變化也可由于傳代、換液而緩解。因此易被忽視。但個別嚴重者,可致細胞增殖緩慢。甚至從培養器皿脫落。
支原體檢測方法:
1、相差顯微鏡檢測;2、低張處理地衣紅染色觀察; 3、DNA熒光染色法;4、電鏡檢測;5、3-H胸腺嘧啶摻入法; 6、聚合酶鏈反映法; 7、免疫學方法; 8 、支原體的培養。
對于支原體污染的細胞,可以采取補救措施:
1、抗生素排除法:可以用5-10倍于常用量的沖擊法,加入高濃度抗生素后作用24-48小時,再換入常規培養液,有時可能有效。推薦用量:慶大霉素 200ug/ml ,四環素10ug/ml ,卡那霉素50ug/ml 。對于支原體污染抗生素應用,預防性應用比污染后使用好。
2、 加溫除菌:根據支原體耐熱性能差的特點。將受支原體污染的細胞置于41度中作用5-10小時可以殺滅支原體。但由于41度對培養細胞本身也有較大的影響,故處理前,應行預試驗,確定出限度殺傷支原體而對細胞影響較小的處理時間。